在上一期的技術(shù)資料中，上海恒遠(yuǎn)生物為您介紹了胎牛血清蛋白酶實(shí)驗(yàn)的技術(shù)分析，得到了客戶(hù)們的良好反應(yīng)。根據(jù)技術(shù)員的整理，為大家?guī)?lái)了新的技術(shù)內(nèi)容。今天我們就一起來(lái)看看，Elisa實(shí)驗(yàn)選擇什么方程去擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)zui合適呢？
    在s曲線(xiàn)的低濃度部門(mén)可以用乘冪方程很好的擬合，中低濃度部門(mén)可以用直線(xiàn)方程，中間部門(mén)可用對(duì)數(shù)方程，而中后段可用四參數(shù)。免疫檢測(cè)時(shí)尺度點(diǎn)(可以是倍比稀釋的，也可以不是)濃度假如和相應(yīng)的吸光度(od)值假如能夠呈現(xiàn)直線(xiàn)關(guān)系當(dāng)然是的了，這時(shí)可以通過(guò)exell等利便的獲得擬合曲線(xiàn)，進(jìn)而推算出樣品的濃度值。
    關(guān)于尺度曲線(xiàn)的擬合方式，直線(xiàn)、二次曲線(xiàn)、三次曲線(xiàn)、指數(shù)、對(duì)數(shù)等雖都可用于Elisa及其它生物學(xué)反應(yīng)中的曲線(xiàn)擬合，但都只合用于曲線(xiàn)的一部門(mén)，有的合用于前半段，有的合用于后半段，有的合用于中間一段，而logistic曲線(xiàn)則對(duì)曲線(xiàn)的全部都有較好的合用性。在一個(gè)長(zhǎng)的區(qū)間內(nèi)，logistic應(yīng)該都能擬合得較為理想。假如用來(lái)定量，s形曲線(xiàn)的中間段(較陡處)是比較好的，而兩真?zhèn)€平坦部門(mén)計(jì)算誤差會(huì)大，有時(shí)甚至?xí)艽?。用于免疫檢測(cè)的所謂“尺度曲線(xiàn)"實(shí)在稱(chēng)為擬合曲線(xiàn)比較合適。目前上zui流行的免疫檢測(cè)擬合方式是“四參數(shù)邏輯擬合"，用這種擬合方式往往能夠比較的反映濃度和吸光度的曲線(xiàn)關(guān)系，從而進(jìn)一步比較準(zhǔn)確的獲得樣品中待測(cè)物質(zhì)的濃度值。但我們做免疫檢測(cè)很少有時(shí)候能夠有這么理想的情況，標(biāo)品濃度和相應(yīng)od值往往是"s"型的曲線(xiàn)關(guān)系，這時(shí)就不能用直線(xiàn)擬合的方式了，而對(duì)擬合方法進(jìn)行選擇就是必要的了。樞紐在于你的尺度曲線(xiàn)做到了s形的哪一部門(mén)，你想檢測(cè)的樣品濃度在曲線(xiàn)的哪一部門(mén)。當(dāng)然，假如用于定量，仍是在中間一段較好。但建模型是一回事，而用它來(lái)定量是另一回事。這些方法固然沒(méi)有一種方法可以通用，但也都可以用。但并不是說(shuō)它就是的。事實(shí)上不僅是Elisa，其它良多生物學(xué)反應(yīng)都是s形曲線(xiàn)，也都可以用logistic曲線(xiàn)擬合。
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